解決方案 | 枸杞中農藥殘留量的測定

摘要

近年來國家出臺系列相關政策支持傳統中醫的創新和發展，將中醫藥發展列入國家發展戰略，中醫藥將對社會發展做出更大貢獻。在2016年印發的《中醫藥發展戰略規劃綱要（2016—2030年）》中提出，到2020年，實現人人基本享有中醫藥服務，中醫藥產業成為國民經濟重要支柱之一；到2030年，中醫藥服務領域實現全覆蓋，中醫藥健康服務能力顯著增強，對社會經濟發展作出更大貢獻，傳統中醫的創新發展將迎來高光時刻。而作為中醫藥中重要的組成部分——中藥也成為了人們關注的焦點，中藥中農藥的殘留量的檢測和限定也成為了中藥使用過程中的一個重要環節。作為我們日常常見及廣泛使用的中藥中的一類，枸杞子中農藥殘留的檢測也成為使用和食用枸杞子的一個必要環節。

近年來，隨著國內外對農藥殘留相關標準的日益完善、監管力度的不斷加強、責任主體安全意識的持續提高，農藥殘留檢測技術得到快速發展，萊伯泰科可以提供智能化、一體化的農殘前處理解決方案。

本文參考《GB 23200.11-2016 食品安全國家標準 桑枝、金銀花、枸杞子和荷葉中413種農藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-質譜法》提供枸杞子中部分農藥殘留的測定方案。

1、儀器設備及試劑耗材

1.1儀器設備

SPE1000全自動固相萃取系統，萊伯泰科

MVP全自動高通量真空平行濃縮儀，萊伯泰科

液相色譜-串聯質譜儀：配有電噴霧離子源(ESI)  AB4500

全自動均質儀MH-400，萊伯泰科

MiniLab 3000全自動液體處理平臺，萊伯泰科

M64高通量平行濃縮儀，萊伯泰科

1.2標準品

19種農藥混標農殘標準儲備液：100μg/mL

19種農藥混標農殘標準工作液：取100μL的標準儲備液于10mL的容量瓶中，用乙腈定容，得到濃度為1μg/mL的標準工作液。

2、實驗過程

2.1提取

稱取樣品枸杞子1.0g（精確至0.01g），置于50mL離心管中，加入5mL水，15mL乙腈，15000r/min均質提取1min，加入2g氯化鈉，再均質提取1min，取上清液于40mL帶尾管濃縮杯中，在離心管中加入15mL乙腈，重復均質提取1min，8000r/min離心5min,取全部上清液與之前的上清液合并。于溫度40℃，轉數200r/min，梯度壓力500mbar/1min-300mbar/2min-220mbar/5min-200mbar/5min-180mbar/15min條件下減壓真空濃縮至1~2mL，用4mL乙腈-甲苯（3+1）沖洗濃縮杯壁，并重復1次，待凈化。

加標樣品，于稱樣完成時加入1μg/mL的標準工作液100μL，提取步驟同上。

2.2 SPE凈化

在TPH柱中加入2cm高無水硫酸鈉，按照圖1所示進行SPE1000方法編輯，加載并運行方法，完成2.1中所有樣品的萃取凈化。

收集洗脫液于60mL收集瓶中，于溫度40℃、轉數180r/min、梯度壓力500mbr/1min-300mbar/2min-200mbar/3min-180mbar/10min-150mbar/10min-100mabr/30min條件下減壓真空濃縮近干，并于溫度40℃、壓力3psi條件下經M64氮吹至干，加入1mL乙腈，混勻。0.22μm濾膜過濾，液相色譜-串聯質譜測定。

圖1  固相萃取方法

2.3液相色譜-串聯質譜條件

A）色譜柱：C18，柱長100mm，內徑2.1mm，粒徑2.7μm

B）流動相：0.1%甲酸水：乙腈，梯度見表1.

C）柱溫：40℃

D）進樣量：10μL

E）離子源：ESI

F）掃描方式：正離子掃描

G）檢測方式：多反應監測

H）離子噴霧電壓：5500

表一液相梯度表

2.4標準曲線配置

標準曲線使用MiniLab 3000 全自動液體處理平臺配置，具體步驟見圖2。

圖2標準曲線配置步驟

3、實驗結果

3.1標準曲線總離子色譜圖

圖3 標準曲線色譜圖

3.2基質空白離子色譜圖

圖4 基質空白色譜圖

3.3加標樣品離子色譜圖

圖5 加標樣品色譜圖

3.4各目標物曲線線性

圖6 標準曲線圖

3.5 加標回收結果

表2 加標回收率結果

4.結果與討論

本方法使用SPE1000全自動固相萃取系統對枸杞子中甲拌磷、毒死蜱、克百威等19種農藥進行萃取，經MVP減壓濃縮后用液相色譜-串聯質譜/質譜器進行檢測，加標回收率范圍在65.0%-104.7%，RSD為2.21%-9.54%，方法的加標回收率滿足要求，適合枸杞子中甲拌磷、毒死蜱、克百威等農藥殘留的檢測。

此次實驗使用了MH-400、MVP、SPE1000、M64及MiniLab3000整體解決方案，全過程高度自動化、批量化，減少實驗中提取試劑的轉移，提高實驗效率、節省了實驗人員的時間，儀器封閉及主動排廢的功能減少了實驗室和環境的污染，保護實驗人員安全。

參考標準

GB 23200.11-2016 食品安全國家標準 桑枝、金銀花、枸杞子和荷葉中413種農藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-質譜法